牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR方法的建立与应用

为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法，本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针，并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明，建立的LSDV荧光定量PCR方法在3.67×10¹ ～3.67×10⁷ copies/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系，线性相关系数达0.9905；该方法具有良好的敏感性，其检测病毒系列含量下限为3.67×10 copies/μL；该方法特异性良好，与山羊痘病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒等病毒不存在交叉反应；该方法重复性较好，批内和批间的变异系数均介于0.133%～1.81%。该方法，临床样品的检测符合率达90%。本试验所建立的LSDV荧光定量PCR方法为临床诊断牛结节性皮肤病提供了一种快速、灵敏的检测方法，为LSDV流行病学调查和监测提供了技术支持。