| 猪流行性腹泻病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 董苏洁,孔宁,秦文珍,翟焕杰,翟雪滢,杨心雨,童武,郑浩,于海,童光志,李有文,单同领.猪流行性腹泻病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国动物传染病学报,2024(2):174-180. |
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| 作者姓名： | 董苏洁 孔宁 秦文珍 翟焕杰 翟雪滢 杨心雨 童武 郑浩 于海 童光志 李有文 单同领 |
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| 作者单位： | 1. 塔里木大学动物科学与技术学院;2. 中国农业科学院上海兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31872478,32102665,31760741)；;上海自然科学基金(19ZR1469100)； |
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| 摘 要： | 为了建立高效、灵敏的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法，本研究从GenBank数据库中获取PEDV N基因序列，扩增出PEDV N基因标准质粒，并在N基因的保守区域内设计了一对特异性荧光定量引物，成功建立了SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。经过一系列试验表明，该检测方法线性关系良好，R2值为0.99；特异性强，敏感性高，最低可检测至2.23 copies/μL，比普通PCR灵敏约100倍；重复性好，组内变异系数为0.25%～0.43%，组间变异系数为0.67%～0.97%；对于各地区96份临床样品检测出PEDV阳性率为25%。本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法为PEDV的临床诊断、流行病学调查以及定量研究提供了有效的检测工具。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 N基因 SYBR Green I 荧光定量PCR |
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