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| 鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备 | |
| 引用本文： | 刘胜旺,潘蔚绮,孔宪刚,李广兴,夏春. 鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备[J]. 中国兽医学报, 2003, 23(5): 427-430 |
| 作者姓名： | 刘胜旺 潘蔚绮 孔宪刚 李广兴 夏春 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 2. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030 3. 中国农业大学,动物医学院,北京,100094 |
| 基金项目： | 国家“8 63”计划资助项目 (2 0 0 1AA2 490 3 2 ) |
| 摘 要： | 将编码鸡白细胞介素-18(interleukin-18，IL-18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pPROEXTMHT中，构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在，目的蛋白表达量占菌体蛋白的30％。SDS-PAGE和Western blot分析显示，表达的鸡IL-18融合蛋白相对分子质量约为23000。包涵体被6mol／L盐酸胍裂解后，通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-18融合蛋白及其纯化产物经3次肌肉注射豚鼠，制备豚鼠抗鸡IL-18多克隆抗血清，并用琼脂扩散试验多克隆抗血清进行了证明。本试验成功的原核表达、纯化了鸡IL-18融合蛋白，并制备了抗鸡IL-18多克隆抗血清，为下一阶段关于鸡IL-18重组蛋白生物学特性及其应用的研究打下了坚实的基础。 |
| 关 键 词： | 鸡白细胞介素-18基因 原核表达 多克隆抗血清 重组蛋白 制备 细胞因子 |
| 文章编号： | 1005-4545(2003)05-0427-03 |
| 修稿时间： | 2002-08-16 |
Expression of Chicken Interleukin-18 in E. coli and Preparation of Its Antiserum |
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| LIU Sheng wang ,PAN Wei qi ,KONG Xian gang ,LI Guang xing ,XIA Chun. Expression of Chicken Interleukin-18 in E. coli and Preparation of Its Antiserum[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2003, 23(5): 427-430 | |
| Authors: | LIU Sheng wang PAN Wei qi KONG Xian gang LI Guang xing XIA Chun |
| Affiliation: | LIU Sheng wang 1,PAN Wei qi 2,KONG Xian gang 1,LI Guang xing 2,XIA Chun 3 |
| Abstract: | |
| Keywords: | prokaryotic expression chicken IL 18 fusion protein purification antiserum |
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