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猪IL-2基因真核表达载体的构建及在酵母中的表达
引用本文:张巧颖 景志忠 栗震亚 陈国华. 猪IL-2基因真核表达载体的构建及在酵母中的表达[J]. 中国兽医科技, 2006, 36(4): 315-319
作者姓名:张巧颖 景志忠 栗震亚 陈国华
作者单位:[1]中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046 [2]兰州大学生命科学学院,甘肃兰州730000
基金项目:农业结构调整重大技术研究专项(04-10-03B);兰州市科技攻关计划项目(05-1-47)
摘    要:用真核表达引物从pGEM-IL-2重组质粒中扩增出猪IL-2基因,将目的基因和真核表达载体pPIC9K连接转入E.coli的JM109中,得到了猪pPIC9K-IL-2重组表达质粒。通过电激法将经SalⅠ酶切线性化的pPIC9K-IL-2质粒转化到巴斯德毕赤酵母GS115感受态细胞中,利用甲醇诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,表明在摇床水平及发酵罐中均表达出约17ku大小的分泌性目的蛋白,采用Sephadex G-100分子筛层析对其表达产物进行纯化,纯化结果理想。

关 键 词:白细胞介素-2 基因 毕赤酵母 表达
文章编号:1673-4696(2006)04-0315-05
收稿时间:2006-02-15
修稿时间:2006-04-04

Construction of eukaryotic vector with porcine IL-2 gene and its expression in Pichia pastoris
ZHANG Qiao-ying ,JING Zhi-zhong ,LI Zhen-ya ,CHEN Guo-hua. Construction of eukaryotic vector with porcine IL-2 gene and its expression in Pichia pastoris[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2006, 36(4): 315-319
Authors:ZHANG Qiao-ying   JING Zhi-zhong   LI Zhen-ya   CHEN Guo-hua
Abstract:
Keywords:IL-2    gene   Pichia pastoris    expression
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