牛分枝杆菌分枝菌酸环丙烷合酶PCAA的表达与鉴定 |
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作者姓名: | 王聃 刘建东 刘思国 王春来 刘慧芳 宫强 王勇 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物细菌病研究室,哈尔滨,150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物细菌病研究室,哈尔滨,150001;东北农业大学,哈尔滨,150030 |
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摘 要: | 以牛分枝杆菌Vallee株基因组为模板,利用PCR方法扩增该菌株的环丙烷一分枝茵酸合酶pcaA基因,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达重组融合蛋白,并利用Ni-亲和层析的方法纯化出重组蛋白。通过鉴定其免疫活性。试验结果表明,成功扩增出了牛分枝杆菌中pcaA基因并纯化出了重组的融合蛋白,通过免疫印记发现,重组蛋白可与牛结核阳性血清发生特异性反应,为进一步研究牛分枝杆菌的致病机理奠定基础。
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关 键 词: | 牛分枝杆菌 持续感染 pcaA基因 |
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