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| 根癌农杆菌介导的芥菜型油菜高效遗传转化 | |
| 作者单位： | ;1.淄博职业学院制药与生物工程系;2.青海师范大学生命与地理科学学院;3.中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心 |
| 摘 要： | 【目的】建立芥菜型油菜(Brassica juncea)高效遗传转化体系。【方法】以芥菜型油菜带柄子叶为材料,采用农杆菌介导的转化方法,将外源基因导入芥菜型油菜愈伤组织,并获得再生植株。【结果】外植体在侵染前,预先在含2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+6mg/L AgNO3的MS培养基上进行预培养23d。侵染63d。侵染68min后转入共培养培养基中28min后转入共培养培养基中23d,之后转到含10mg/L卡那霉素的MS筛选培养基上进行筛选培养23d,之后转到含10mg/L卡那霉素的MS筛选培养基上进行筛选培养23周。对成活植株进行GUS染色和PCR验证,证明外源基因已经成功转入芥菜型油菜的基因组中。【结论】通过优化愈伤组织诱导条件和农杆菌侵染时间,可显著提高芥菜型油菜的遗传转化效率。 |
| 关 键 词： | 芥菜型油菜 子叶柄 遗传转化 |
Efficient Agrobacterium-mediated Transformation Protocol of Brassica juncea |
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