马铃薯SGAs合成代谢途径末端SGT酶基因克隆及序列分析

 糖苷生物碱（ＳＧＡｓ）是一类存在于茄科植物和百合科植物的重要次生代谢物，与植物抗逆性和产品品质有密切关系，同时在医药上具有广泛的药理学活性。茄啶：糖基转移酶（ＳＧＴ）为ＳＧＡｓ合成代谢途径末端关键酶，研究其基因结构及其编码的酶蛋白特性，对于调控植物体内ＳＧＡｓ合成及其通过微生物发酵生产ＳＧＴｓ有重要的作用和意义。通过生物信息学分析方法预测３个糖基转移酶ｃＤＮＡ 编码的酶蛋白结构和特性。以马铃薯块茎表皮总ＲＮＡ 为模板，采用ＲＴ－ＰＣＲ 的方法扩增出３个糖基转移酶（ＳＧＴ１、ＳＧＴ２和ＳＧＴ３）基因片段并克隆到ｐＭＤＲ１９ Ｔ载体。阳性克隆经ＰＣＲ 鉴定后进行测序，序列分析结果表明，克隆到的sgt １、sgt ２ 和sgt ３ 三个同源的序列片段（１４６７～１５１８ｂｐ），编码４８８～５０５ 个氨基酸；所得序列与ＧｅｎＢａｎｋ 中注册的高等植物ＳＧＴ 酶基因核苷酸序列（Ｕ８２３６７．２、ＤＱ２１８２７６．１和ＤＱ２６６４３７）的同源性均在９９．１２％以上，氨基酸同源性达到９９％以上，３个基因都具有ＵＤＰＧ 糖基转移酶保守结构域及许多重要功能位点；ＰＩ为５．５２～５．６２。三级结构预测表明，该氨基酸同糖基转移酶单体结构模型相似，都为糖基转移酶家族成员，具有合成类固醇糖苷生物碱的功能，基因序列已注册到Ｇｅｎ Ｂａｎｋ，序列注册号分别为：sgt １，ＪＮ６９５００５；sgt ２，ＪＮ６９５００６；sgt  ３，ＨＭ１８８４４７。

Cloning and sequence analysis of terminase gene of glycoalkaloid biosynthesis metabolismic pathway in potato