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猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定
引用本文:米立娟,吕宗吉,张守峰,刘晔,王永志,扈荣良. 猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定[J]. 吉林农业大学学报, 2012, 0(6): 661-666
作者姓名:米立娟  吕宗吉  张守峰  刘晔  王永志  扈荣良
作者单位:吉林农业大学动物科学技术学院;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;佛山科学技术学院;吉林省农业科学院
基金项目:农业部公益性行业项目(201203056)
摘    要:克隆了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CC-11株的N基因全序列,将其克隆至原核表达载体pET28a,转化E.coliRosetta株后经0.5 mmol/L IPTG诱导,获得了高水平表达。对表达的N蛋白进行纯化,以50μgN蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,通过间接ELISA筛选,获得9B12、7C2、7C6共3株稳定分泌抗PRRSV-N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,亚型鉴定结果分别为IgG2b、IgG1、IgG1亚型。通过Western blot分析和间接免疫荧光测定表明,3株单抗对PRRSV CC-11株、CH-1R和JXA1-R细胞毒以及4份临床疑似病料均发生特异性反应。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  N蛋白  单克隆抗体

Preparation and Identification of the Monoclonal Antibodies against the Nucleoprotein of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus
MI Li-juan,L Zong-ji,ZHANG Shou-feng,LIU Ye,WANG Yong-zhi,HU Rong-liang. Preparation and Identification of the Monoclonal Antibodies against the Nucleoprotein of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus[J]. Journal of Jilin Agricultural University, 2012, 0(6): 661-666
Authors:MI Li-juan  L Zong-ji  ZHANG Shou-feng  LIU Ye  WANG Yong-zhi  HU Rong-liang
Affiliation:1,31.College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;2.Foshan University of Science and Technology,Foshan 528200,China;3.Institute of Military Veterinary,AMMS,Key Laboratory of Jilin Province for Zoonosis Prevention and Control,Changchun 130122,China;4.Jilin Academy of Agricultural Sciences,Changchun 130133,China
Abstract:
Keywords:
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