兔胚胎核移植操作条件的建立

本文对影响家兔胚胎细胞核移植的几个重要因素进行了研究。以不同的融合电场强度对重组胚进行处理，结果表明脉冲参数为１．６５ｋｖ／ｃｍ，脉宽为８５μｓ，脉冲数为１时，融合率达到７７．１％。显著高于其它场强的融合率。当场强增加至２．５０ｋｖ／ｃｍ时，多数重组胚发生溶解。融合液中的离子成份对重组胚的激活有重要影响。以０．３Ｍ甘露醇为融合液时，电激三次的激活率（５０％）显著高于一次（３６％）和二次（２２．２％Ｐ＜０．０５）。当加入１００μｎＣａ２＋时，电激三次后的激活率达到７１．４％，显著高于电激一次（４８％，Ｐ＜０．０１）和二次（６１．３％，Ｐ＜０．０５）。多次电激还可提高重组胚的发育率，当有Ｃａ２＋存在时，三次电激后的囊胚发育率为３１．４％。此外，随着卵母细胞卵龄的增加，重组胚的囊胚发育率下降，而融合胚的碎裂率则增高。当卵龄为ＨＣＧ后２１—２４小时，碎裂率高达５２％。对８－，１６－，３２－细胞期卵裂球的重组胚体外发育能力的研究表明，８－细胞期卵裂球的重组胚之囊胚发育率显著高于１６－及３２－细胞期卵裂的重组胚（３６．４％比２６％、２７．５％，Ｐ＜０．０５）。将部分３２－细胞期卵裂球的重组胚移入受体后，产出了３只核移植

A Study on Factors Affecting the Efficiency of Nuclear Transplantation in Rabbit