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嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测
引用本文:任燕,陆承平,姚火春. 嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测[J]. 中国水产科学, 2006, 13(6): 924-928
作者姓名:任燕  陆承平  姚火春
作者单位:1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所鱼病中心,广州,510380
2. 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏,南京,210095
基金项目:江苏省攻关(三药)项目
摘    要:根据已发表的人源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)温敏胞外蛋白酶基因eprA1的核甘酸序列,设计合成一对引物,以嗜水气单胞菌鱼源株Ah J-1基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到1 005 bp的胞外蛋白酶基因eprJ1,将该基因片段连接到pMD18-T载体中,构建克隆载体pMD-eprJ1。序列分析发现,其与发表的Ah AH1的胞外蛋白酶eprA1基因的同源性有91%。根据测序结果在保守区重新设计一对引物以增强特异性,扩增片段大小为387 bp。对1990~2004年15年间从浙江、福建、湖北及江苏等地不同患病水产动物肝肾等脏器分离到的23株Ah检测结果显示,从中国东南地区分离的21株Ah水生动物致病性菌株扩增均为阳性,2株Ah非致病性菌株为阴性,推测该基因普遍存在于致病性Ah中。检测模板DNA的灵敏度可达1.5×10-3ng/μL。

关 键 词:嗜水气单胞菌  温敏胞外蛋白酶基因  克隆与检测
文章编号:1005-8737(2006)06-0924-05
收稿时间:2005-12-28
修稿时间:2006-04-06

Cloning ,sequence analysis and detection of an extracellular temperature-labile protease encoding gene(eprJ) from Aeromonas hydrophila
REN Yan,LU Cheng-ping,YAO Huo-chun. Cloning ,sequence analysis and detection of an extracellular temperature-labile protease encoding gene(eprJ) from Aeromonas hydrophila[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2006, 13(6): 924-928
Authors:REN Yan  LU Cheng-ping  YAO Huo-chun
Abstract:
Keywords:Aeromonas hydrophila    extracellular temperature-labile protease gene   cloning   detection
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