螺旋藻培养液中五氧化二磷含量的测定

螺旋藻(Spirulina platensis)是一种微型蓝藻，藻丝呈螺旋状，盛产于非洲和南美洲的碱水湖中。一百多年前当地居民已用于制造食品，由于它富含蛋白质，引起了营养学家极大兴趣。1973年在美国召开的微生物蛋白质国际会议上提出螺旋藻为新的蛋白源，1974年联合国世界粮食会议确认螺旋藻为重要蛋白源。此后，人们注意到螺旋藻的开发。在螺旋藻人工养殖的培养液中，磷是必需元素，它直接影响着螺旋藻的产量和质量。当培养液中磷缺乏时，就会造成藻群体的生长减慢，光合速度下降，生物量及蛋白质含量下降。为了确保产品质量和产量，并减少肥料的浪费，作者提出一种简便、快速、适合 　　大批样品检测的方法，对科学养殖螺旋藻提供可靠的依据。 　　1 材料和方法 　　1.1 仪器 　　 DU－640型紫外/可见光分光光度计。 　　1.2 试剂 　　 HNO3(二级)，NH4VO3(AR)，(NH4)6Mo7024.4H2O(AR)，KH2PO4(AR)。 　　1.3 硝酸溶液 　　 浓HNO3与水1∶1(V/V)混合。 　　1.4 显色剂 　　 称50 g钼酸铵［(NH4)6Mo7O24，4H2O］溶于少量水中。另将1.12 g偏钒酸铵(NH4VO3)溶于200 ml沸水中，冷却后，加150 ml硝酸溶液，再冷却至室温，将钼酸铵溶液缓慢地注入偏钒酸铵溶液中，并不断搅拌，用水定容至1 000 ml。 　　1.5 KH2PO4标准溶液(CP2O5=1.0g/L) 　　 准确称取105℃干燥2 h的KH2PO41.956 g溶于水中，并转入1 000 ml容量瓶中，加2～3 ml硝酸溶液，用水定容。 　　1.6 标准曲线绘制 　　 于50 ml容量瓶中分别吸取KH2PO4标准液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml，显色定容后的磷浓度分别为0、10、20、30、40、50、60 mg/L。在440 nm下测定吸光值，计算直线回归方程及绘制标准曲线。 　　1.7 待测液制备及测定 　　 将螺旋藻培养液过滤，吸取滤液20 ml于50 ml容量瓶中，显色定容后测定吸光值。 　　1.8 显色 　　 在上述50 ml容量瓶中加适量水，使总体积约为30 ml，然后依次加入硝酸溶液2.0 ml、显色剂10.0 ml，用水定容、摇匀，半小时后测定。 　　1.9 结果计算 　　 将测得的吸光值代入回归方程计算出五氧化二磷的含量，再乘以稀释倍数，即为培养液中五氧化二磷的含量。 　　1.10 精密度试验 　　 随机抽出样品溶液5份，按同样的方法和仪器条件，对每个样品作多次重复测定并计算标准差和变异系数。 　　1.11 回收试验 　　 在待测滤液中加入10 ml 0.1g/L的KH2PO4标准溶液，测定其含量，并计算平均回收率。……