微量元素铜对软骨细胞胰岛素样生长因子mRNA基因表达的影响 |
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引用本文: | 钱剑,刘国文,王哲.微量元素铜对软骨细胞胰岛素样生长因子mRNA基因表达的影响[J].中国兽医科技,2005,35(7):565-569. |
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作者姓名: | 钱剑 刘国文 王哲 |
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作者单位: | [1]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062//塔里木农垦大学动物科技学院,新疆阿拉尔843300 [2]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062//内蒙古民族大学动物科技学院,内蒙古通辽028042 [3]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062 |
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摘 要: | 分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF—Ⅰ)的cDNA,与pMD18-T载体相连,转化JM109大肠埃希氏菌,提取质粒,经鉴定,所扩增的片段为目的片段。在此基础上培养仔猪关节软骨细胞,并在培养液中添加不同水平的铜,分别在第0、12、24、48h收集软骨细胞,提取总RNA,采用RT—PCR法扩增出IGF—Ⅰ的cDNA,以β-actin为内参,用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析,计算IGF—Ⅰ mRNA基因表达的相对水平。结果,在细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中IGF—Ⅰ mRNA基因表达,其中以铜浓度31.2μmol/L的效果最好。表明铜对软骨细胞的增殖作用是通过促进IGF—Ⅰ mRNA的表达来实现的。
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关 键 词: | 铜 软骨细胞 胰岛素样生长因子-Ⅰ RT—PCR 基因表达 |
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