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重组米曲霉丝氨酸羧肽酶O的性质鉴定及脱苦应用研究
引用本文:陈 丹,游子娟,黄伟谦,等. 重组米曲霉丝氨酸羧肽酶O的性质鉴定及脱苦应用研究[J]. 广东农业科学, 2015, 42(5): 103-108
作者姓名:陈 丹  游子娟  黄伟谦  
作者单位:华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
摘    要:为了研究羧肽酶在蛋白水解及对蛋白水解物脱苦中的重要作用,利用毕赤酵母表达系统对米曲霉(Asperigillus oryzae)羧肽酶O(carboxypeptidase O,OcpO)进行表达.重组米曲霉羧肽酶O(rOcpO)经过分子筛和离子柱纯化,对其进行脱糖基化及酶学性质的检测研究.结果表明,该蛋白酶是以糖蛋白的形式进行表达,分子量约为74 ku,脱糖基化后的相对分子质量约为56 ku,产量约为20.4 nKat/mL.该蛋白酶是一种酸性蛋白酶,最适pH值为4.0,且在pH 3.0~6.0时保持稳定;最适温度约为40℃,具有良好的热稳定性,在60℃孵育1h后仍能保持63%的酶活;PMSF能够显著抑制该酶酶活,证明其为丝氨酸羧肽酶.通过rOcpO对大豆蛋白和酪蛋白的Alcalase蛋白酶水解物的进一步水解研究发现,rOcpO水解对两种水解液的苦味均有明显减轻,并且水解度有明显升高.

关 键 词:米曲霉  重组羧肽酶O  酶学性质  脱苦

Characteristics of carboxypeptidase O from Asperigillus oryzae expressed in Pichia pastoris and its application in protein hydrolysis and debittering
CHEN Dan,YOU Zi-juan,HUANG Wei-qian,MA Na-na,LUO Xiao-chun. Characteristics of carboxypeptidase O from Asperigillus oryzae expressed in Pichia pastoris and its application in protein hydrolysis and debittering[J]. Guangdong Agricultural Sciences, 2015, 42(5): 103-108
Authors:CHEN Dan  YOU Zi-juan  HUANG Wei-qian  MA Na-na  LUO Xiao-chun
Abstract:
Keywords:Aspergillus oryzae   recombinant carboxypeptidase O   enzymatic characteristics   debittering
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