| 犬ELF4基因原核表达及其卵黄抗体的制备 |
| |
| 引用本文： | 喻娇,曹馨,唐青海,侯鑫军,高翠翠,韩涛涛,黎露,刘会敬,唐斯萍.犬ELF4基因原核表达及其卵黄抗体的制备[J].南方农业学报,2022,53(8):2359-2372. |
| |
| 作者姓名： | 喻娇 曹馨 唐青海 侯鑫军 高翠翠 韩涛涛 黎露 刘会敬 唐斯萍 |
| |
| 作者单位： | 衡阳师范学院生命科学与环境学院/南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室/动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室, 湖南衡阳 421008 |
| |
| 基金项目： | 国家级大学生创新创业训练计划项目（202110546001）；湖南省自然科学基金面上项目（2021JJ30060）；湖南省教育厅科学研究项目重点项目（21A0442）；湖南省重点研发计划项目（2021NK2026） |
| |
| 摘 要： | 【目的】克隆犬转录因子ELF4基因（cELF4），体外表达重组c ELF4蛋白（rcELF4）并制备抗该蛋白的卵黄抗体（IgY），为深入探究犬ELF4蛋白功能提供基础材料。【方法】采用RT-PCR扩增cELF4基因，将目的基因克隆至pMD19-T载体构建重组质粒并测序，运用生物信息学软件分析其核苷酸序列及编码的氨基酸序列特征。将c ELF4基因克隆至原核表达载体pET-28a，构建重组表达质粒pET28a-cELF4，分别转化大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)感受态细胞，诱导表达后对表达产物进行SDS-PAGE检测和Western blotting鉴定。将rcELF4蛋白分别与3种免疫佐剂（ISA 15AVG、ISA 71VG、ISA 201VG）乳化制备免疫原，通过免疫蛋鸡检测抗体滴度和IgY含量。构建真核重组表达载体pEGFP-cELF4，转染细胞后，利用免疫过氧化物酶细胞单层试验（IPMA）分析c ELF4特异性IgY的免疫活性。【结果】cELF4基因（GenBank登录号MZ198105）的开放阅读框（ORF）为1992 bp，编码663个氨基酸残基。cELF...
|
| 关 键 词： | 犬ELF4蛋白 原核表达 真核表达 佐剂 卵黄抗体 |
| 收稿时间： | 2022-01-15 |
Prokaryotic expression and egg yolk antibody of canine ELF4 gene |
| |
| YU Jiao,CAO Xin,TANG Qing-hai,HOU Xin-jun,GAO Cui-cui,HAN Tao-tao,LI Lu,LIU Hui-jing,TANG Si-ping.Prokaryotic expression and egg yolk antibody of canine ELF4 gene[J].Journal of Southern Agriculture,2022,53(8):2359-2372. |
| |
| Authors: | YU Jiao CAO Xin TANG Qing-hai HOU Xin-jun GAO Cui-cui HAN Tao-tao LI Lu LIU Hui-jing TANG Si-ping |
| |
| Institution: | College of Life Sciences and Environment/Hunan Key Laboratory for Conservation and Utilization of Biological Resources in the Nanyue Mountainous Region/Hengyang Key Laboratory of New Detection Technology and Biological Agents of Animal Microorganism, Hengyang Normal University, Hengyang, Hunan 421008, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
|
| 点击此处可从《南方农业学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《南方农业学报》下载免费的PDF全文 |
|
