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棉花黄萎病相关基因GhMYB6的克隆与功能分析
引用本文:代培红,胡子曜,李秀青,雷建峰,刘超,刘晓东,李月. 棉花黄萎病相关基因GhMYB6的克隆与功能分析[J]. 南方农业学报, 2022, 53(11): 3020-3027. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2022.11.002
作者姓名:代培红  胡子曜  李秀青  雷建峰  刘超  刘晓东  李月
作者单位:1. 新疆农业大学生命科学学院, 新疆乌鲁木齐 830052;2. 新疆农业大学农学院/教育部棉花工程研究中心/农业生物技术重点实验室, 新疆乌鲁木齐 830052
基金项目:国家自然科学基金项目(32160494)新疆农业大学生物学创新团队开放项目(ITB202106)
摘    要:【目的】克隆陆地棉MYB家族基因GhMYB6,并对其在棉花抗黄萎病反应中的功能进行初步探究,为挖掘棉花抗病相关基因及棉花抗病育种提供参考。【方法】基于棉花转录组测序数据,筛选并克隆了响应黄萎病菌侵染的基因GhMYB6,对其序列进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在黄萎病诱导下的表达模式,并利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术初步验证棉花抗黄萎病中的生物学功能。【结果】克隆获得的GhMYB6基因开放阅读框(ORF)为258 bp,编码85个氨基酸残基,理论等电点(pI)为9.34,脂肪系数为73.41,平均疏水性为-0.793,相对分子质量为9.86 kD,不稳定指数为73.41,为亲水性、碱性的非跨膜蛋白,无信号肽,定位于细胞核,在第11~63氨基酸处含有1个SANT结构域。GhMYB6蛋白与雷蒙德氏棉GrMYB6聚在同一小分支上,说明二者的亲缘关系较近。GhMYB6基因在V991侵染后6和12 h时相对表达量较对照(未侵染处理,CK)极显著下调(P<0.01),72 h时显著上调(P<0.05,下同),24和48 h时与CK无显著差异(P>0.05)。与阴性对照植株TRV:00相比,GhMYB6基因沉默植株萎蔫程度和叶片黄化更严重,病情指数显著升高,茎秆的褐变程度更严重,且茎段在培养基上生长的真菌菌丝数量明显增多。【结论】GhMYB6基因响应黄萎病菌V991侵染,当抑制GhMYB6基因表达后,棉花对黄萎病菌的敏感性增强,抗性明显降低,推测GhMYB6是棉花抗黄萎病防御的一个正向调节因子。

关 键 词:棉花黄萎病   MYB家族基因   基因克隆   病毒诱导的基因沉默(VIGS)   功能验证
收稿时间:2022-04-09

Cloning and functional analysis of GhMYB6 gene related to cotton Verticillium wilt resistance
DAI Pei-hong,HU Zi-yao,LI Xiu-qing,LEI Jian-feng,LIU Chao,LIU Xiao-dong,LI Yue. Cloning and functional analysis of GhMYB6 gene related to cotton Verticillium wilt resistance[J]. Journal of Southern Agriculture, 2022, 53(11): 3020-3027. DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2022.11.002
Authors:DAI Pei-hong  HU Zi-yao  LI Xiu-qing  LEI Jian-feng  LIU Chao  LIU Xiao-dong  LI Yue
Affiliation:1. College of Life Sciences, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang 830052, China;2. College of Agronomy/Research Center of Cotton Engineering, Ministry of Education/Laboratory of Agricultural Biotechnology, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang 830052, China
Abstract:
Keywords:
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