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牛碱性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的生物学活性
引用本文:刘华忠 杨兴元 李晴 安晓荣 陈永福 钟杰平 李琨. 牛碱性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的生物学活性[J]. 中国兽医科技, 2007, 37(10): 896-900
作者姓名:刘华忠 杨兴元 李晴 安晓荣 陈永福 钟杰平 李琨
作者单位:[1]广东海洋大学现代生物化学中心,广东湛江524088 [2]中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京100094
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)项目(2002AA206311);广东海洋大学自然科学基金项目(0512152)
摘    要:采用巢式PCR方法克隆了牛18ku-bFGF基因完整的编码序列,并构建了原核表达载体pET-28a-bFGF,将其转化大肠杆菌BL21,在25℃低温条件下,用0.5 mmol/L IPTG诱导表达5 h,用Ni-NTA亲和纯化细胞裂解上清液,经Western-blotting检测,结果显示,在特定的诱导条件下,重组牛bFGF基因在大肠杆菌中获得了表达,并且主要以可溶性状态存在于细胞中。经检测,纯化后的重组蛋白能显著促进成纤维细胞的增殖(P〈0.05),其活性与商品用重组人18ku-bFGF没有差异(P〉0.05)。表明,所获得的可溶性重组牛18ku-bFGF蛋白具有较高的生物学活性,可用于后续研究工作。

关 键 词:牛碱性成纤维细胞生长因子 原核表达 活性检测
文章编号:1673-4696(2007)10-0896-05
收稿时间:2007-07-09
修稿时间:2007-09-20

Expression of bovine basic fibroblast growth factor gene in Escherichia coli and bioactivity of the expressed product
LIU Hua-zhong ,YANG Xing-yuan ,LI Qing ,AN Xiao-rong ,CHEN Yong-fu , ZHONG Jie-ping , LI Kun. Expression of bovine basic fibroblast growth factor gene in Escherichia coli and bioactivity of the expressed product[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2007, 37(10): 896-900
Authors:LIU Hua-zhong   YANG Xing-yuan   LI Qing   AN Xiao-rong   CHEN Yong-fu    ZHONG Jie-ping    LI Kun
Abstract:
Keywords:bovine basic fibroblast growth factor   prokaryotic expression  activity analysis
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