| 柿属植物ISSR分析技术的建立 |
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| 引用本文： | 张青林,罗正荣. 柿属植物ISSR分析技术的建立[J]. 农业生物技术学报, 2004, 12(5): 521-525 |
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| 作者姓名： | 张青林 罗正荣 |
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| 作者单位： | 华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.3027092)资助. |
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| 摘 要： | 以部分柿属(Diospyros)植物为材料,对ISSR-PCR反应体系腗g2+、dNTPs、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶浓度,退火温度及扩增循环次数进行了探讨,确立了适合柿属植物ISSR分析技术体系在25 μL反应体系中,含1× Buffer,Mg2+2.0或2.5 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.6 μmol/L,Taq DNA聚合酶1U,甲酰胺2%,模板DNA 2.4 ng/μL;PCR扩增程序94℃变性3 min;94℃ 30 s,(Tm+2)℃(根据引物不同设定)45 s,72℃1.5 min,35个循环;72℃延伸7 min;2%琼脂糖电泳分离PCR产物.结果为柿属植物遗传多样性和分子系统学研究提供技术支持.
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| 关 键 词： | ISSR分析 引物 植物 遗传多样性 ISSR-PCR 技术体系 TaqDNA聚合酶 琼脂糖电泳 扩增 Mg^2＋ |
| 修稿时间： | 2003-11-20 |
Establishment of Inter-simple Sequence Repeat Technique in Genus Diospyros spp. |
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