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猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定
引用本文:赵婷芳,高翠翠,唐青海,赵铖,蔡林娜,侯鑫军,刘婷,全飞杨,胡意,刘会敬,杨灿,杨海.猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定[J].湖南畜牧兽医,2023(1):38-43.
作者姓名:赵婷芳  高翠翠  唐青海  赵铖  蔡林娜  侯鑫军  刘婷  全飞杨  胡意  刘会敬  杨灿  杨海
作者单位:1. 衡阳师范学院生命科学学院;2. 南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室;3. 动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室
基金项目:湖南省自然科学基金面上项目(2021JJ30060);
摘    要:为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至p ET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果显示:重组PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白的分子量约为30 k Da,在不同温度下都以包涵体形式存在,在37℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达的Cap蛋白表达量最高。试验成功制备了PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白,为制备PCV2二价疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。

关 键 词:猪圆环病毒2型  Cap蛋白  原核表达  诱导  包涵体
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