猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定 |
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引用本文: | 赵婷芳,高翠翠,唐青海,赵铖,蔡林娜,侯鑫军,刘婷,全飞杨,胡意,刘会敬,杨灿,杨海.猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定[J].湖南畜牧兽医,2023(1):38-43. |
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作者姓名: | 赵婷芳 高翠翠 唐青海 赵铖 蔡林娜 侯鑫军 刘婷 全飞杨 胡意 刘会敬 杨灿 杨海 |
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作者单位: | 1. 衡阳师范学院生命科学学院;2. 南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室;3. 动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室 |
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基金项目: | 湖南省自然科学基金面上项目(2021JJ30060); |
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摘 要: | 为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至p ET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果显示:重组PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白的分子量约为30 k Da,在不同温度下都以包涵体形式存在,在37℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达的Cap蛋白表达量最高。试验成功制备了PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白,为制备PCV2二价疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。
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关 键 词: | 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 原核表达 诱导 包涵体 |
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