柱状黄杆菌弱毒株和车轮虫混合感染致金鱼烂鳃病的病原分析

【目的】确诊北京地区某养殖场金鱼发生烂鳃病的病原。【方法】采集具有临床症状的濒死金鱼，制作鳃组织的水浸片进行寄生虫和真菌观察，取肝脏、肾脏、脾脏、鳃组织开展金鱼造血器官坏死病病毒(GFHNV)检测。同时，从鳃上分离病原菌，分析病原菌的形态特征、理化特性、分类地位及药物敏感性等特性；采取鳃组织划痕浸泡和未划痕浸泡方式开展病原菌的人工感染试验。【结果】自然发病鱼鳃丝上有少量车轮虫寄生，未观察到真菌菌丝，GFHNV核酸检测呈阴性。从鳃组织分离到大量假根状菌落，该菌株为革兰染色阴性长杆菌，菌体大小(0.5～0.7)μm×(4～8)μm,氧化酶、过氧化氢酶阳性，降解明胶和硫酸软骨素，产生硫化氢，不发酵葡萄糖等糖醇类，基于16S rDNA序列构建的进化树与柱状黄杆菌聚为一枝，确认分离菌为柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare),基因型Ⅰ型。划痕浸泡的各组金鱼均出现死亡，症状与自然发病鱼相似，划痕对照组和未划痕浸泡组均未出现死亡，经计算该菌对金鱼的半数致死量(LD₅₀)为8.8×10⁶ CFU,为弱毒株。该菌对恩诺沙星、盐酸多西环素和...