| 奶牛CRY1基因真核表达载体构建、生物信息学分析及组织表达谱研究 |
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| 引用本文： | 李丹,张海森,王逸群,高登科,赵泓淙,李超,靳亚平,陈华涛.奶牛CRY1基因真核表达载体构建、生物信息学分析及组织表达谱研究[J].中国畜牧兽医,2023(3):870-881. |
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| 作者姓名： | 李丹 张海森 王逸群 高登科 赵泓淙 李超 靳亚平 陈华涛 |
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| 作者单位： | 1. 西北农林科技大学动物医学院;2. 西北农林科技大学农业农村部动物生物技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(31771301)；;中国博士后科学基金第11批特别资助(2018T111112)； |
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| 摘 要： | 【目的】扩增奶牛隐花色素昼夜节律调节因子1(cryptochrome circadian regulator 1,CRY1)基因全长编码区(coding sequence, CDS),构建该基因的真核表达载体并对其进行生物信息学分析，检测奶牛CRY1基因的表达谱，为后续探究CRY1蛋白的生物学功能提供参考。【方法】以奶牛肝脏组织cDNA为模板，PCR扩增CRY1基因CDS区，将其与酶切线性化的pcDNA3.1-3HA空质粒以同源重组法连接，重组质粒命名为pcDNA3.1-3HA-cCRY1;利用在线软件对奶牛CRY1基因进行生物信息学分析。将空质粒pcDNA3.1-3HA和重组质粒pcDNA3.1-3HA-cCRY1转染至HEK293T细胞，利用Western blotting技术检测奶牛CRY1基因在蛋白水平的表达；利用实时荧光定量PCR检测CRY1基因在奶牛不同组织中的表达量。【结果】试验成功获得1 764 bp的奶牛CRY1基因CDS区序列，且成功构建pcDNA3.1-3HA-cCRY1真核表达载体。奶牛CRY1基因与牦牛、山羊、绵羊相似性在98%以上，且遗传距离较近。生物信息学...
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| 关 键 词： | 奶牛 CRY1基因 生物信息学 组织表达谱 |
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