猪圆环病毒3型Cap重组鞭毛蛋白融合表达及其免疫原性研究 |
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引用本文: | 姜海军,王丹,郭禹,韦莉,侯磊,王菁,朱珊珊,刘爵.猪圆环病毒3型Cap重组鞭毛蛋白融合表达及其免疫原性研究[J].中国畜牧兽医,2023(5):2044-2052. |
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作者姓名: | 姜海军 王丹 郭禹 韦莉 侯磊 王菁 朱珊珊 刘爵 |
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作者单位: | 1. 北京市农林科学院畜牧兽医研究所;2. 河北农业大学动物医学院;3. 扬州大学兽医学院 |
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摘 要: | 【目的】利用重组杆状病毒系统表达猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3) Cap重组鞭毛蛋白并研究该蛋白的反应原性和免疫原性,为开发PCV3亚单位疫苗提供数据支持。【方法】通过对Cap基因进行最适密码子优化并与鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因Flagellin进行融合后克隆到pFastBacTMⅠ载体。通过Bac-to-Bac系统,筛选获得重组Cap-Flagellin杆状病毒,利用SDS-PAGE、间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)和Western blotting鉴定重组杆状病毒,将重组Cap-Flagellin杆状病毒免疫小鼠评价其免疫原性。【结果】重组Cap-Flagellin杆状病毒在Sf9细胞中能有效表达重组蛋白,SDS-PAGE检测可见68 ku的目的条带。IFA结果显示,重组Cap-Flagellin杆状病毒感染后72 h在Sf9细胞膜及胞浆中均出现绿色特异性荧光;Western blotting分析表明,重组蛋白能与PCV3阳性血清发生特异性反应,表明重...
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关 键 词: | 猪圆环病毒3型(PCV3) 重组杆状病毒 Cap蛋白 鞭毛蛋白 免疫特性 |
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