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牦牛骨骼肌中特异基质金属蛋白酶及其功能相关基因的表达分析
作者姓名:武志娟  柴志欣  王吉坤  王嘉博  钟金城  信金伟
作者单位:1. 西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室;2. 省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室
基金项目:国家肉牛牦牛产业技术体系(CARS-37);
摘    要:【目的】筛选并鉴定在牦牛骨骼肌中特异表达的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)家族成员及其功能相关基因,以期为研究牦牛骨骼肌结构形成机制提供依据。【方法】采集成年公牦牛臀肌和胸肌,利用组织化学染色法(HE和Masson)分析肌纤维特征和胶原纤维数量;通过实时荧光定量PCR鉴定MMPs和基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的mRNA表达量;采用Western blotting技术和免疫组织化学法分析MMPs、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白的表达量和组织分布;通过STRING网站分析MMPs及其功能相关基因之间的蛋白质互作网络;采用EnzChekTM明胶酶/胶原酶试剂盒检测牦牛臀肌和胸肌中明胶酶/胶原酶的酶活性差异。【结果】Masson染色和实时荧光定量PCR分析结果显示,牦牛臀肌中胶原纤维面积、MMP-2和MMP-14基因表达量显著低于胸肌(P<0.05),TIMP-3基因在牦牛臀肌中表达量显著高于胸肌(P<0.05)。Western blotting鉴定发现,MMP-3、MMP-14、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白在牦牛臀肌中的表达量极...

关 键 词:牦牛  骨骼肌  基质金属蛋白酶(MMPs)  胶原蛋白
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