鸭干扰素因子7基因克隆及组织表达特异性分析 |
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引用本文: | 邓志超,章程,罗沛,詹晓芝,江丹莉,阳佑天,刘文俊.鸭干扰素因子7基因克隆及组织表达特异性分析[J].中国畜牧兽医,2023(7):2606-2616. |
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作者姓名: | 邓志超 章程 罗沛 詹晓芝 江丹莉 阳佑天 刘文俊 |
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作者单位: | 1. 仲恺农业工程学院;2. 广东省水禽健康养殖重点实验室;3. 佛山科学技术学院 |
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摘 要: | 【目的】构建樱桃谷鸭干扰素调节因子7(interferon regulatory factor 7,IRF7)基因CDS区序列的真核表达载体,分析IRF7蛋白结构和生物特性,检测不同组织内IRF7基因的表达水平,为进一步对鸭天然免疫系统开展研究奠定基础。【方法】利用RT-PCR扩增樱桃谷鸭IRF7基因的CDS区,构建真核表达质粒,利用Western blotting检测蛋白表达。使用荧光显微镜观察Poly(I∶C)对IRF7蛋白核移位的影响。对IRF7基因序列进行核苷酸相似性比对,构建系统进化树,并通过生物信息学方法在线分析预测IRF7蛋白的分子和结构特征。实时荧光定量PCR检测不同组织中IRF7基因的表达特异性。【结果】成功克隆樱桃谷鸭IRF7基因CDS区,长1 536 bp,共编码512个氨基酸,通过对重组质粒的真核表达,提取细胞总蛋白,Western blotting检测蛋白表达,结果显示重组蛋白大小约为110 ku。Poly(I∶C)处理鸭胚成纤维细胞促使pCMV-C-EGFP-IRF7的核内定位增加。核苷酸相似性结果显示,樱桃谷鸭与绿头鸭和鸡的IRF7基因核苷酸序列相似性分别...
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关 键 词: | 干扰素调节因子7(IRF7) 蛋白结构 亚细胞定位 |
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