| 捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证 |
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| 引用本文： | 余旭平,朱军莉,姚学萍,何世成,牛冬.捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2004,30(2):127-132. |
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| 作者姓名： | 余旭平 朱军莉 姚学萍 何世成 牛冬 |
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| 作者单位： | 浙江大学,动物医学系,浙江,杭州310029 |
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| 摘 要： | 自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoRⅠ和XbaⅠ间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除HindⅢ位点端EcoRⅠ位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为 3.46 kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因.
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| 关 键 词： | 细菌 输出蛋白编码基因 信号肽 克隆载体 |
| 文章编号： | 1008-9209(2004)02-0127-06 |
| 修稿时间： | 2002年11月8日 |
Construction of a low molecular weight plasmid vector for the capture of genes encoding exported proteins |
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| YU Xu-ping,ZHU Jun-li,YAO Xue-ping,HE Shi-cheng,NIU Dong.Construction of a low molecular weight plasmid vector for the capture of genes encoding exported proteins[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2004,30(2):127-132. |
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| Authors: | YU Xu-ping ZHU Jun-li YAO Xue-ping HE Shi-cheng NIU Dong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bacteria genes encoding exported proteins signal peptide cloning vector |
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