| 斑石鲷肾脏细胞系的建立、特征分析及其免疫相关基因的表达分析 |
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| 引用本文： | 王洁,王娜,俄泽琛,巩志宏,张子威,陈张帆,陈松林. 斑石鲷肾脏细胞系的建立、特征分析及其免疫相关基因的表达分析[J]. 中国水产科学, 2022, 29(11): 1529-1540 |
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| 作者姓名： | 王洁 王娜 俄泽琛 巩志宏 张子威 陈张帆 陈松林 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201306 ；中国水产科学研究院黄海水产研究所, 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室, 山东 青岛 266071;上海海洋大学水产与生命学院, 上海 201306 ；中国水产科学研究院黄海水产研究所, 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室, 山东 青岛 266071 ；山东省海洋渔业生物技术与遗传育种重点实验室, 山东 青岛 266071 |
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| 基金项目： | 山东省重点研发计划项目(2021LZGC028)； 农业农村部物种品种资源保护费项目-海洋渔业生物资源收集与保藏； 中国水产科学研究院创新团队专项(2020TD20)； 山东省泰山学者攀登计划项目. |
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| 摘 要： | 斑石鲷(Oplegnathus punctatus)是我国重要的海水养殖鱼类, 本研究以斑石鲷肾脏组织为材料, 建立了斑石鲷肾脏组织细胞系(O. punctatus kidney cell line, OPK)。斑石鲷肾脏细胞系生长旺盛, 目前已成功传至 34 代。本研究检测了不同 FBS 浓度对斑石鲷肾脏细胞生长的影响, 结果表明最适生长 FBS 浓度为 20%。将 OPK 细胞液氮冷冻复苏后, 细胞具有活性, 可正常生长和传代。核型分析结果显示, 第 24 代斑石鲷肾脏细胞系核型为正常二倍体核型(2n=2sm+46t)。将 Cy3-siRNA 转染到 OPK 细胞后, 可以成功表达荧光。对斑石鲷 OPK 细胞提取 DNA, 用斑石鲷线粒体色素细胞 C 氧化酶 I (CO I)基因进行检测, 结果表明该细胞系来源于斑石鲷。斑石鲷肾脏细胞系细胞在受到脂多糖(LPS)和聚肌胞苷酸(poly I∶C)刺激后能产生免疫反应, 免疫相关基因 IκB、IL-1β、IL-8 和 IRF3 的表达水平发生显著变化。本研究成功建立了斑石鲷肾脏细胞系, 可运用于斑石鲷基因功能分析、细胞遗传学、致病性细菌和病毒感染机制等研究, 可为斑石鲷的基础研究和细胞工程育种等提供重要的基础材料。
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| 关 键 词： | 斑石鲷； 肾脏细胞系； 原代培养； 传代培养； 免疫刺激 |
Establishment and characterization of spotted knifejaw (Oplegnathus punctatus) kidney cell line (OPK) and expression analysis of immunerelated genes in OPK |
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| WANG Jie,WANG N,E Zechen,GONG Zhihong,ZHANG Ziwei,CHEN Zhangfan,CHEN Songlin. Establishment and characterization of spotted knifejaw (Oplegnathus punctatus) kidney cell line (OPK) and expression analysis of immunerelated genes in OPK[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2022, 29(11): 1529-1540 |
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| Authors: | WANG Jie WANG N E Zechen GONG Zhihong ZHANG Ziwei CHEN Zhangfan CHEN Songlin |
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