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毛白杨PtCDD基因5′片段的原核表达及功能分析(英文)
引用本文:曹秀利,杜娟,王敏杰,赵树堂,卢孟柱.毛白杨PtCDD基因5′片段的原核表达及功能分析(英文)[J].林业科学,2008,44(9).
作者姓名:曹秀利  杜娟  王敏杰  赵树堂  卢孟柱
作者单位:[1]南京林业大学森林资源与环境学院,南京210037 [2]中国林业科学研究院林业研究所森林培育国家林业局重点实验室,北京100091
摘    要:根据GenBank中毛白杨钙离子依赖型脱氧核糖核酸酶(PtCDD)基因序列,以毛白杨形成层区域的cDNA为模板,经PCR扩增出该基因上游637 bp的cDNA片段。将该片段与PET-30b(+)载体连接,构建杨树PtCDD基因片段原核表达载体并进行表达研究,获得大量的PtCDD-(HIS)6融合蛋白。并进一步对该蛋白进行纯化和功能检测。结果表明:PtCDD基因片段能够在大肠杆菌体内表达出具有DNase功能的蛋白,克服了因表达全酶可能强烈降解DNA所带来的不能最终获得表达产物的问题,为今后PtCDD蛋白的抗体制备以及进一步研究奠定了基础。

关 键 词:毛白杨  PtCDD基因  原核表达  功能鉴定  融合蛋白
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