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沙地云杉种子内参基因的筛选与验证
作者姓名:李佳琪  白玉娥  吉仁花  哈布尔  娜苏勒玛
作者单位:1. 内蒙古农业大学林学院;2. 内蒙古蒙荣园林绿化工程有限公司
基金项目:国家自然科学基金项目(31660212);;内蒙科技攻关项目“沙地云杉体细胞胚胎发生发育条件技术优化”共同资助;
摘    要:为筛选出沙地云杉(Picea mongolica)种子成熟过程中均可稳定表达的内参基因,本研究以沙地云杉种子不同发育时期的样本为研究对象,采用RT-qPCR技术,检测沙地云杉种子转录组数据库中GAPDH、EF1α、CYC、Actin等8个候选内参基因在种子发育过程中呈现的综合表达水平,并通过内参基因分析软件(geNorm, NormFinder, BestKeeper)对其稳定性统一评估。结果表明,候选内参基因中稳定性最好的是CYC、EF1α和GAPDH。分别以CYC、EF1α和GAPDH作为内参基因对沙地云杉胚胎发育关键调控基因LEA1(Late embryogenesis abundant protein)和WOX9 (WUSCHEL related homebox)进行了定量分析,其表达趋势基本一致。本研究结果将对沙地云杉及近缘物种的分子育种研究提供参考。

关 键 词:沙地云杉(Picea mongolica)  内参基因  RT-qPCR  基因表达
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