马尾松RCA基因的克隆和序列分析 |
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作者姓名: | 潘婷 张逢凯 王晓锋 阮倩倩 刘靖 盛璐 季孔庶 |
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作者单位: | 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室,南京林业大学 |
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基金项目: | 国家“十二五”科技支撑项目(2012BAD01B02);林业公益性行业科研专项经费(201104010);江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)共同资助 |
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摘 要: | 1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(Rubis CO)活化酶(RCA)是体内活化光合作用限速酶—Rubis CO的重要酶。本研究通过反转录PCR和c DNA末端快速扩增技术,从马尾松中分离得到了Pmrca1(登录号KF420118)和Pmrca2(登录号KF420119)两条RCA基因c DNA序列。两条序列均包含完整的编码区与5'端和3'非翻译区,长度分别为1 816 bp和1 953 bp,编码Pm RCA1和Pm RCA2两个蛋白,长度分别为480和440个氨基酸。序列分析发现两个蛋白质都具有RCA和AAA+蛋白家族(ATPase associated with various cellular activities)特异性结构域和定位于叶绿体的转运肽,Pm RCA1还具有RCA大同工型特有的由两个半胱氨酸(Cys)残基组成的保守结构。多重序列比对显示,这两个蛋白质序列分别与红花槭的RCA大同工型和小同工型的相似性达到78%。将Pm RCA1和Pm RCA2与20种不同物种RCA构建进化树,发现其与地中海松属于同一分支。研究结果为进一步分析马尾松RCA的功能和光合作用机制奠定了基础。
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关 键 词: | 马尾松 RCA RACE c DNA克隆 序列分析 |
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