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麻鸭IL-18成熟蛋白基因的克隆、表达及其表达产物的生物学活性检测
引用本文:陈红英,崔保安,夏平安,李新生,杨明凡,郑兰兰.麻鸭IL-18成熟蛋白基因的克隆、表达及其表达产物的生物学活性检测[J].农业生物技术学报,2007,15(4):584-588.
作者姓名:陈红英  崔保安  夏平安  李新生  杨明凡  郑兰兰
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002;河南省动物食品安全重点实验室,郑州,450002
2. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
基金项目:国家食品安全重大攻关专项项目
摘    要:应用RT-PCR技术,直接从麻鸭(Tadorna ferruginea)脾淋巴细胞总RNA中扩增出麻鸭IL-18成熟蛋白(mDuIL-18)基因,克隆到pGEM-T Easy载体。测序结果表明获得了mDuIL-18基因,其大小为513bp,并将该基因亚克隆到原核表达载体pQE30。SDS-PAGE可检测到分子质量为19.76kD的重组蛋白,Western blot证实该重组蛋白可与兔抗鸡IL-18血清发生特异性反应。表达产物以包涵体形式存在,经变性和复性处理后明显促进鸭T细胞转化。用mDuIL-18(150或200ng/鸭)和禽流感病毒(AIV)疫苗免疫鸭2周后,血凝抑制(HI)抗体平均滴度达到7.5~7.7log2,而只用AIV疫苗免疫和用mDuIL-18(100ng/鸭)和AIV疫苗免疫的HI抗体平均滴度仅达到6.3~6.6log2,表明mDuIL-18提高AIV灭活油乳苗诱导的免疫应答。

关 键 词:鸭IL-18  成熟蛋白基因  克隆  表达  生物学活性
文章编号:1006-1304(2007)04-0584-05
收稿时间:2006-10-09
修稿时间:2006-12-08

Cloning and Expression of Duck Interleukin-18 Mature Protein Gene and Detection of Its Biological Activity
CHEN Hong-ying,CUI Bao-an,XIA Ping-an,LI Xin-sheng,YANG Ming-fan,ZHENG Lan-lan.Cloning and Expression of Duck Interleukin-18 Mature Protein Gene and Detection of Its Biological Activity[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(4):584-588.
Authors:CHEN Hong-ying  CUI Bao-an  XIA Ping-an  LI Xin-sheng  YANG Ming-fan  ZHENG Lan-lan
Institution:1. College of Animal Husbandry and Veterinary, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China; 2. Animal Food Safety Key Laboratory, Henan Province, Zhengzhou 450002, China
Abstract:
Keywords:duck interleukin-18  mature protein gene  cloning  expression  biological activity
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