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杜仲AFLP反应体系的建立及优化
引用本文:王大玮,李 煜,周 玮.杜仲AFLP反应体系的建立及优化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(6):88-94.
作者姓名:王大玮  李 煜  周 玮
作者单位:西北农林科技大学 林学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 林学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 林学院,陕西省农业分子生物学重点实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(30771751)
摘    要:【目的】建立并优化适合杜仲的AFLP技术体系,为进一步构建其遗传图谱及开展分子标记辅助育种奠定基础。【方法】对杜仲基因组DNA提取方法、酶切与连接体系、预扩增和选择性扩增程序的影响因素进行分析,并对适合杜仲AFLP分析的引物组合进行筛选。【结果】模板DNA的提取采用改进的CTAB法,酶切模板DNA用量500 ng,酶切时间6 h,连接反应时间6 h,预扩增产物最适稀释倍数30倍。同时筛选出E-AAG+M-CAA,E-AAG+M-CAT,E-AAG+M-CTA,E-AAG+M-CTG,E-ACA+M-CAA,E-ACA+M-CTA,E-ACC+M-CTG共7对适合杜仲AFLP分析的引物组合。【结论】经重复验证,建立的AFLP反应体系适用于杜仲的AFLP分析。

关 键 词:杜仲  AFLP  体系优化  引物筛选
收稿时间:2009/12/1 0:00:00

Establishment and optimization of AFLP reaction system in Eucommia ulmoides Oliv.
WANG Da-wei,LI Yu,ZHOU Wei,LI Zhou-qi.Establishment and optimization of AFLP reaction system in Eucommia ulmoides Oliv.[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(6):88-94.
Authors:WANG Da-wei  LI Yu  ZHOU Wei  LI Zhou-qi
Institution:(College of Forestry,Northwest A&F University,Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Eucommia ulmoides Oliv    AFLP  establishment and optimization of the system  screening of primer pairs
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