| 柽柳cDNA文库的构建及ThAQP基因的表达 |
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| 引用本文： | 李慧玉,刘桂丰,刘菲菲. 柽柳cDNA文库的构建及ThAQP基因的表达[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, 38(7): 161-166 |
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| 作者姓名： | 李慧玉 刘桂丰 刘菲菲 |
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| 作者单位： | 东北林业大学 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室;东北林业大学 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室;东北林业大学 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（30972386）；中央高校基本科研业务费专项资金项目（DL09BA22） |
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| 摘 要： | 【目的】构建NaCl胁迫下柽柳根部cDNA文库,在盐胁迫下检测柽柳水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)基因的表达,探讨AQPs与柽柳耐盐性的关系。【方法】以0.4mol/LNaCl胁迫处理的刚毛柽柳(Tamarix hispida)根部组织为试材,分别构建未经盐胁迫及胁迫24,48h的cDNA文库,并测定文库滴度。对从文库中获得的EST序列进行拼接,获得刚毛柽柳AQP(ThAQP)的单一序列,对其进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR方法,研究ThAQP基因在盐胁迫后的刚毛柽柳根和叶中的表达情况。【结果】构建的NaCl胁迫0,24,48h3个文库的初始滴度分别为1.0×106,1.4×106和1.2×106pfu/mL,插入片段的平均长度分别为0.8,0.9和0.85kb,平均重组率为98.2%。文库克隆随机测序获得了刚毛柽柳的7条ThAQP基因单一序列,这7条ThAQP基因分别与水通道蛋白的4个亚家族成员基因具有很高的同源性。在根和叶中,这7条ThAQP基因表达对盐胁迫的响应不同,在根部ThAQP1～ThAQP4相对表达量增多,而其他基因的相对表达量变化不明显;在叶部,ThAQP7在胁迫24h时相对表达量出现小幅度上升,而其他6条ThAQP的相对表达量则明显下降。【结论】ThAQP基因可能与柽柳抵御盐胁迫有关。
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| 关 键 词： | 柽柳 cDNA文库 NaCl胁迫 水通道蛋白 |
| 收稿时间： | 2010-02-03 |
Construction of cDNA library of Taramix hispida and expression of ThAQP genes |
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| LI Hui-yu,LIU Gui-feng,LIU Fei-fei,WANG Shan. Construction of cDNA library of Taramix hispida and expression of ThAQP genes[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2010, 38(7): 161-166 |
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| Authors: | LI Hui-yu LIU Gui-feng LIU Fei-fei WANG Shan |
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| Affiliation: | (Key Laboratory of Forest Tree Genetics Breeding and Biotechnology,Ministry of Education,Northeast Forestry University,Harbin,Heilongjiang150040,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Taramix sp. cDNA library NaCl treatment aquaporin |
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