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山羊输卵管上皮细胞的分离与培养
引用本文:李 港,杨 艳,王爱华. 山羊输卵管上皮细胞的分离与培养[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, 38(6): 71-76
作者姓名:李 港  杨 艳  王爱华
作者单位:西北农林科技大学 动物医学院,农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室;西北农林科技大学 动物医学院,农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室;西北农林科技大学 动物医学院,农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室
基金项目:教育部博士点基金项目(200807120022);陕西省科技发展项目(2008K02-01)
摘    要:【目的】分离并培养山羊输卵管上皮细胞,研究其生长特性。【方法】采用胰酶、胶原酶及机械刮取方法分离输卵管上皮细胞并分析培养效果;选择免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定;向培养液中添加下丘脑粗提物、胰岛素、EGF和血清,探讨其对输卵管上皮细胞体外培养的影响。【结果】胰酶对山羊输卵管上皮细胞的分离效果较差,胶原酶次之,机械刮取方法较好。机械刮取法分离的细胞以细胞团居多,接种后8~12 h开始贴壁生长,生长2~3d细胞呈现明显的铺路石形态。免疫细胞化学染色显示,细胞角蛋白阳性率在95%以上。上皮细胞培养体系中含少量血清及人EGF、胰岛素,能有效促进原代和传代输卵管上皮细胞的生长,以体积分数5%血清+EGF的培养效果较好。【结论】采用机械刮取法分离培养的输卵管上皮细胞,在体外可连续传到第8代,传代细胞活性强、纯度高,可为输卵管上皮细胞相关功能的研究提供材料。

关 键 词:山羊  输卵管上皮细胞  胶原酶
收稿时间:2009-03-23

Isolation and culture of goat oviduct epithelial cells
LI Gang,YANG Yan,WANG Ai-hua,JIN Ya-ping,LI Qian. Isolation and culture of goat oviduct epithelial cells[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2010, 38(6): 71-76
Authors:LI Gang  YANG Yan  WANG Ai-hua  JIN Ya-ping  LI Qian
Affiliation:(Key Laboratory of Animal Reproductive Endocrinology and Embryo Biotechnology of Agriculture Ministry of China,College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:
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