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山羊PTHrP基因CDs区克隆及其融合蛋白的表达
引用本文:杨振宇,郑惠玲,邢瑞芳.山羊PTHrP基因CDs区克隆及其融合蛋白的表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(10):45-50.
作者姓名:杨振宇  郑惠玲  邢瑞芳
作者单位:西北农林科技大学 动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 动物科技学院,陕西省农业分子生物学重点实验室
基金项目:西北农林科技大学科研启动基金项目(08080112);农业部公益性行业科研专项(3-45)
摘    要:【目的】克隆山羊甲状旁腺相关肽(Parathyroid hormone related protein,PTHrP)基因,并进行原核表达,获得具有生物学活性的融合蛋白。【方法】无菌采集山羊乳腺组织,采用TRIZOL法提取总RNA,RT-PCR克隆山羊PTHrP基因全CDs区。将山羊PTHrP基因全CDs区插入pET-32a(+)表达质粒构建pET-PTHrP质粒,经酶切和测序鉴定后,将其转化E.coliBL21(DE3)菌株,经2mmol/LIPTG、37℃诱导表达8h后,进行SDS-PAGE和Westernblotting分析。【结果】获得了山羊PTHrP基因全CDs区,长534bp(GenBank登录号GU573787);酶切和测序显示,原核表达载体pET-PTHrP构建成功;SDS-PAGE和Westernblotting分析表明,在E.coliBL21(DE3)中成功诱导表达了pET-PTHrP融合蛋白。【结论】克隆了山羊PTHrP基因,获得了PTHrP融合蛋白。

关 键 词:PTHrP基因  原核表达  蛋白纯化  山羊
收稿时间:2010/3/29 0:00:00

Cloning of Capra hircus PTHrP and its prokaryotic expression in Escherichia coli
YANG Zhen-yu,ZHENG Hui-ling,XING Rui-fang,ZHU Zhen-zhen,AN Jun-hui.Cloning of Capra hircus PTHrP and its prokaryotic expression in Escherichia coli[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(10):45-50.
Authors:YANG Zhen-yu  ZHENG Hui-ling  XING Rui-fang  ZHU Zhen-zhen  AN Jun-hui
Institution:(Key Laboratory for Molecule Biology of Agriculture,College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:PTHrP gene  prokaryotic expression  protein purification  Capra hircus
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