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慢病毒介导shRNA抑制Sirt1基因表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响
引用本文:杨 杨,张 朝,庞卫军. 慢病毒介导shRNA抑制Sirt1基因表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, 38(12): 31-37
作者姓名:杨 杨  张 朝  庞卫军
作者单位:西北农林科技大学 动物科技学院 动物脂肪沉积与肌肉发育实验室;西北农林科技大学 动物科技学院 动物脂肪沉积与肌肉发育实验室;西北农林科技大学 动物科技学院 动物脂肪沉积与肌肉发育实验室
基金项目:国家自然科学基金项目(30600437);西北农林科技大学青年学术骨干支持计划(0114030)
摘    要:【目的】探讨慢病毒介导的shRNA干扰系统抑制脱乙酰基酶1(Sirtuin type 1,Sirt1)表达对猪前体脂肪细胞凋亡的影响。【方法】构建pLentiH1-Sirt1shRNA慢病毒载体,将其感染猪前体脂肪细胞,运用Hoechst33258染色,于荧光显微镜下观察细胞的形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹检测细胞凋亡标志物Cleaved caspase-3的表达情况。【结果】pLentiH1-Sirt1shRNA慢病毒载体可抑制猪前体脂肪细胞中Sirt1的表达,显微镜下可见细胞体积缩小、染色质凝集、核固缩等典型的凋亡特征;流式细胞术显示细胞凋亡率较空载体对照组明显增加,早期和晚期凋亡细胞百分率分别从4%和9%(P0.05)上升至30%和32%(P0.05);Western印迹检测显示Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著上调。【结论】慢病毒介导的shRNA可有效地抑制猪前体脂肪细胞中Sirt1的表达,显著促进细胞凋亡,提示Sirt1可能在前体脂肪细胞凋亡中发挥着重要作用。

关 键 词:Sirt1  shRNA  慢病毒  猪前体脂肪细胞  细胞凋亡
收稿时间:2010-05-06

Effects of Sirt1 inhibition by lentivirus mediated shRNA vector on apoptosis of porcine preadipocytes
YANG Yang,ZHANG Zhao,PANG Wei-Jun,YANG Gong-She. Effects of Sirt1 inhibition by lentivirus mediated shRNA vector on apoptosis of porcine preadipocytes[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2010, 38(12): 31-37
Authors:YANG Yang  ZHANG Zhao  PANG Wei-Jun  YANG Gong-She
Affiliation:(Laboratory of Animal Fat Deposition and Muscle Development,College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:
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