| 猪囊尾蚴MTsCL-1基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 宋军科,才学鹏,窦永喜. 猪囊尾蚴MTsCL-1基因的原核表达[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2010, 38(10): 15-18 |
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| 作者姓名： | 宋军科 才学鹏 窦永喜 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物科技学院；中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 甘肃省动物寄生虫病重点实验室;中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 甘肃省动物寄生虫病重点实验室;中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 甘肃省动物寄生虫病重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家高科技研究发展计划“863”项目（ 2006AA10A207） |
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| 摘 要： | 【目的】探讨原核表达猪囊尾蚴TsCL-1蛋白的生物学特性，为研究半胱氨酸蛋白酶(Cysteine proteinase,CP)在猪囊尾蚴与宿主相互关系中的作用奠定基础。【方法】将含有猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因的pGEX-4T TsCL-1重组质粒转入大肠杆菌BL21进行表达，诱导后的重组菌裂解上清通过谷胱甘肽（GST）琼脂糖亲和层析法进行纯化，纯化产物利用明胶蛋白电泳法进行活性检测。【结果】经SDS-PAGE分析显示，猪囊尾蚴TsCL-1基因表达的重组蛋白相对分子质量约为61 ku，表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的57.4%。表达产物应用GST琼脂糖凝胶纯化后，纯化蛋白的纯度可达90%以上。明胶蛋白电泳结果显示，纯化蛋白对明胶具有水解活性，并且其水解活性能被半胱氨酸蛋白酶特异性抑制剂E-64抑制。【结论】从重组菌中成功表达了目的蛋白，该蛋白具有明显的水解活性，且E-64对其水解活性有抑制作用。
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| 关 键 词： | 猪囊尾蚴；半胱氨酸蛋白酶；TsCL1基因 原核表达；纯化；水解活性 |
| 收稿时间： | 2010-03-27 |
Prokaryotic expression of TsCL-1 gene from Taenia solium metacestode |
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| SONG Jun-ke,,CAI Xue-peng,DOU Yong-xi ,LUO Xue-nong,LIN Qing,YU San-ke. Prokaryotic expression of TsCL-1 gene from Taenia solium metacestode[J]. Journal of Northwest A&F University（Natural Science Edition）, 2010, 38(10): 15-18 |
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| Authors: | SONG Jun-ke CAI Xue-peng DOU Yong-xi LUO Xue-nong LIN Qing YU San-ke |
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| Affiliation: | SONG Jun-ke1,2,CAI Xue-peng2,DOU Yong-xi 2,LUO Xue-nong2,LIN Qing1,YU San-ke1 (1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China,2 China Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province,State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou,Gansu730046,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cysticercus cellulose cysteine protease TsCL1 gene prokaryotic expression purification hydrolytic activity |
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