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小鼠Foxc2质粒载体的构建及功能鉴定
引用本文:赵 霞,景旭斌,刘 静,赵涛涛,杨海丽,孙 超. 小鼠Foxc2质粒载体的构建及功能鉴定[J]. 西北农业学报, 2012, 21(5): 26-31
作者姓名:赵 霞  景旭斌  刘 静  赵涛涛  杨海丽  孙 超
作者单位:西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100
摘    要:构建pcDNA3.1-Foxc2真核表达载体,并以脂质体转染3T3-L1前体脂肪细胞,探究Foxc2对脂代谢的影响。取孕后15d小鼠腹部脂肪组织提取总RNA,用PCR扩增Foxc2全长序列并连接至pMD18-T载体,测序正确后克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体,成功构建pcDNA3.1-Foxc2重组质粒载体。重组质粒转染3T3-L1前体脂肪细胞系,以未转染和空载体转染作为对照,通过RT-PCR和Western blotting法检测Foxc2核酸及蛋白表达,同时检测3T3-L1前体脂肪细胞中脂代谢相关基因FAS、ATGL、HSL及PPARγ的表达。结果显示,重组质粒转染组细胞中Foxc2的核酸和蛋白水平均显著高于对照组。同时发现超表达Foxc2显著降低FAS表达,显著升高HSL及PPARγ的表达,但是对ATGL的表达无显著影响,表明Foxc2具有抑制脂肪沉积的功能。

关 键 词:叉头框C2(Foxc2)  真核表达载体pcDNA3.1  细胞转染  脂肪沉积

Construction and Function Identification of Eukaryotic PlasmidCarrying Mouse Foxc2 Gene
ZHAO Xi,JING Xubin,LIU Jing,ZHAO Taotao,YANG Haili and SUN Chao. Construction and Function Identification of Eukaryotic PlasmidCarrying Mouse Foxc2 Gene[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2012, 21(5): 26-31
Authors:ZHAO Xi  JING Xubin  LIU Jing  ZHAO Taotao  YANG Haili  SUN Chao
Affiliation:(College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Forkhead box ( Foxc2)   Eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1   Cell transfection   Fat deposition
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