| 猪乳铁蛋白基因克隆及其在P.methanolica系统中的表达研究 |
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| 引用本文： | 刘光富,刘明启.猪乳铁蛋白基因克隆及其在P.methanolica系统中的表达研究[J].黑龙江畜牧兽医,2012(19):10-13,17,162. |
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| 作者姓名： | 刘光富 刘明启 |
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| 作者单位： | 中国计量学院生命科学学院 |
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| 基金项目： | 浙江省教育厅科研计划项目(Y201018892) |
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| 摘 要： | 为了研究猪乳铁蛋白(PLF)基因克隆及其在酵母(P.methanolica)系统中的表达,试验从泌乳15 d的约克夏母猪乳腺组织中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增猪乳铁蛋白基因,获得1条长为2 115 bp的目的片段,将目的基因克隆到酵母表达载体pMET-B中,采用电转化法转化P.methanoli-ca感受态细胞PMAD11;选取Ade+MutS重组子进行诱导培养,产物纯化后进行SDS-PAGE和West-ern-blot分析及其他生物学特性分析。结果表明:rPLF在P.methanolica表达系统中表达,表达产物的分子质量约为78.0 ku;在第144小时时表达量最高,最佳pH值为7.0,最佳铁离子浓度为100μmol/L;重组PLF对大肠杆菌ATCC25922有抑菌效果,而且抑菌效果随着浓度的升高随之增强。
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| 关 键 词： | 猪乳铁蛋白 酵母 克隆 表达 |
Cloning of recombinant porcine lactoferrin and its expression in a P.methanolica system |
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| LIU Guang-fu,LIU Ming-qi.Cloning of recombinant porcine lactoferrin and its expression in a P.methanolica system[J].Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine,2012(19):10-13,17,162. |
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| Authors: | LIU Guang-fu LIU Ming-qi |
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| Institution: | (College of life sciences,China Jiliang University,Hangzhou 310018) |
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