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| 芒果MiRab11基因及突变体的原核表达分析 | |
| 作者姓名： | 刘召亮 罗聪 董龙 何新华 艮文全 李丽淑 韦鹏霄 |
| 作者单位： | 广西大学农学院;广西大学农学院;广西大学农学院;广西大学农学院;1 广西大学农学院 2 广西农业科学院广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室;广西大学农学院;广西大学农学院 |
| 基金项目： | 广西自然科学基金(No. 2013GXNSFDA019011)；广西自然科学基金项目（No. 2011GXNSFA018115）. |
| 摘 要： | 为研究芒果MiRab11蛋白的互作及其它生物学功能,本文在MiRab11基因序列基础上,采用重叠PCR定点突变技术,获得了2个结构域突变体Mi-Rab11CA和Mi-Rab11DN,将其构建原核表达载体,并成功转化大肠杆菌BL21。SDS-PAGE结果显示,在28℃条件下,用0.5 mmol/L IPTG诱导4 h,可获得大量可溶性蛋白的表达。将可溶性蛋白经Ni-NTA argrose层析柱纯化并western blot鉴定,该重组蛋白均可与抗His单克隆抗体发生特异性免疫反应。本研究为深入研究芒果pET-Rab11蛋白生理活性、特异性结合位点及功能调控打下良好基础。 |
| 关 键 词： | 芒果；MiRab11；突变体蛋白；原核表达；纯化；鉴定 |
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