鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的I型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析 |
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引用本文: | 王文成,张贵刚.鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的I型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析[J].中国兽药杂志,2002,36(12):24-26,46. |
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作者姓名: | 王文成 张贵刚 |
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摘 要: | 提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1,O2和O78的基因组DNA作为模板,用TD-PCR技术从其中分别扩增出了0.55kb的I型菌毛细菌基因(piliA),将扩增得到的piliA基因片段,TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T载体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到含阳性重组子的菌株,提取质粒用PstI单酶切及NcoI和PstI双酶切鉴定,结果证实,所构建的克隆质粒中均含有相应piliA基因,经DNA序列分析,其结果基因阅读框架大小为549bp,但其中O1菌株I型菌毛基因在第72位发生突变,有6个碱基插入,经DNA Star核酸分析软件分析,此3菌株的I型菌毛基因的同源性为89.9%-92%。
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关 键 词: | 同源性分析 鸡 致病性大肠杆菌 I型菌毛 DNA测序 基因克隆 |
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