表面展示传染性法氏囊病病毒VP2蛋白细菌样颗粒的构建与鉴定 |
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引用本文: | 洪新雅,段姝宇,兰奇官,王瑞楠,朱凡,王春凤,王建忠.表面展示传染性法氏囊病病毒VP2蛋白细菌样颗粒的构建与鉴定[J].黑龙江畜牧兽医,2024(2):65-71+78. |
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作者姓名: | 洪新雅 段姝宇 兰奇官 王瑞楠 朱凡 王春凤 王建忠 |
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作者单位: | 吉林农业大学动物医学院吉林省微生态制剂工程研究中心/动物生产及产品质量安全教育部重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31802223); |
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摘 要: | 为构建表面展示传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus, IBDV)VP2蛋白的细菌样颗粒(bacterium-like particies, BLPs),试验分别克隆VP2基因和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor, PA)基因片段,通过融合PCR技术构建VP2-PA融合基因,利用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建重组杆状病毒rBV-VP2-PA,将表达产物与裸露BLPs共孵育,在PA的介导下,构建表面展示IBDV VP2蛋白的细菌样颗粒(BLPs-VP2);依次采用透射电镜观察、SDS-PAGE、Western-blot、间接免疫荧光对BLPs-VP2进行鉴定。结果表明:VP2蛋白获得成功表达并展示于BLPs表面,可与IBDV阳性血清发生特异性结合,1 U(2.5×109颗粒)BLPs最大可负载约107μg VP2-PA融合蛋白。说明构建的IBDV VP2蛋白BLPs可用于传染性法氏囊病(IBD)新型亚单位疫苗的研发。
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关 键 词: | 传染性法氏囊病 VP2蛋白 细菌样颗粒 细菌表面展示系统 亚单位疫苗 |
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