| 猪瘟病毒E0蛋白在PK-15中的表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 周景明,刘芳冰,祁艳华,张改平,栗宁,王爱萍. 猪瘟病毒E0蛋白在PK-15中的表达与鉴定[J]. 安徽农业科学, 2016, 0(10). DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2016.10.055 |
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| 作者姓名： | 周景明 刘芳冰 祁艳华 张改平 栗宁 王爱萍 |
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| 作者单位： | 1. 郑州大学生命科学学院,河南郑州,450001;2. 郑州大学生命科学学院,河南郑州450001;河南农业大学,河南郑州450002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31172331) |
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| 摘 要： | [目的]研究猪瘟病毒(CSFV)E0基因在PK-15细胞中的表达特性。[方法]通过PCR方法克隆了E0基因全长681 bp的片段,连接到真核表达载体p EGFP-C1上,构建出重组质粒并进行双酶切鉴定。[结果]成功构建出重组质粒p EGFP-E0。通过双酶切鉴定,PCR鉴定和测序确定了目的基因大小一致,插入位置完全正确后,利用Lipofecta mine 2000转染试剂盒将重组质粒转染到猪肾细胞PK-15中,转染48 h后在荧光显微镜下观察,可以看到大多数细胞呈现出绿色荧光,说明转染成功。通过G418筛选后,在荧光显微镜下仍能观察到部分细胞能够呈现出绿色荧光,这表明重组融合蛋白p EGFP-E0在PK-15细胞中得到了表达。[结论]获得的能够表达重组融合蛋白的细胞克隆,为进一步大量表达与纯化E0糖蛋白、制备其单抗以及研究猪瘟病毒E0糖蛋白的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E0蛋白 增强型绿色荧光蛋白 PK-15细胞 |
Expression and Identification of E0 Protein of Classical Swine Fever Virus in PK-15 |
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| ZHOU Jing-ming,LIU Fang-bing,QI Yan-hua,ZHANG Gai-ping,LI Ning,WANG Ai-ping. Expression and Identification of E0 Protein of Classical Swine Fever Virus in PK-15[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2016, 0(10). DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2016.10.055 |
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| Authors: | ZHOU Jing-ming LIU Fang-bing QI Yan-hua ZHANG Gai-ping LI Ning WANG Ai-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CSFV E0 protein Enhanced green fluorescent protein PK-15 cell |
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