猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用 |
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引用本文: | 卢冰霞,刘磊,秦毅斌,赵武,梁家幸,郭旋,黎木兰,李斌,何颖. 猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法的建立与初步应用[J]. 安徽农业科学, 2013, 0(12): 5359-5361,5365 |
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作者姓名: | 卢冰霞 刘磊 秦毅斌 赵武 梁家幸 郭旋 黎木兰 李斌 何颖 |
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作者单位: | 广西兽医研究所,广西南宁530001;广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005;广西大学动物科学技术学院,广西南宁,530005;广西兽医研究所,广西南宁,530001 |
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基金项目: | 广西科技攻关项目,公益性行业(农业)科研专项,广西基本科研业务费专项,广西自然科学基金项目,广西畜禽疫苗新技术重点实验室系统性研究课题 |
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摘 要: | [目的]建立1种快速、灵敏、特异的检测猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。[方法]根据JEV E基因序列的保守区6个位点设计了4条特异性LAMP引物,以JEV阳性样品RNA为模板进行一步法扩增,并对反应条件和反应体系进行了优化。[结果]该方法具有较高的灵敏度,其检测极限为0.5 pg;特异性试验表明其具有较高的特异性,对其他病毒性病原体均无扩增反应。与RT-Nested-PCR相比,2种方法检出率的符合率为90.9%。反应结束后可以通过添加化学发光剂进行可视化观察,大大缩短了检测时间。该方法无需特殊仪器,只需在水浴锅中进行,是一种适于基层的简便、灵敏、快速的猪JE的检测方法。[结论]成功建立了猪流行性乙型脑炎RT-LAMP方法,并在临床上进行了初步应用。
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关 键 词: | 猪流行性乙型脑炎病毒 RT-LAMP 敏感性 特异性 |
The Construction and Application of the Method of RT-LAMP for Swine Japanese Encephalitis |
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Affiliation: | LU Bing-xia et al(Guangxi Veterinary Research Institute,Nanning,Guangxi 530001) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Swine Japanese B encephalitis RT-LAMP Sensitivity Specificity |
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