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丝瓜SRAP-PCR体系建立与优化
引用本文:吴 红,林 清,雷开荣,陈 旭,蒋晓英,陶伟林. 丝瓜SRAP-PCR体系建立与优化[J]. 中国农学通报, 2009, 25(4): 30-34
作者姓名:吴 红  林 清  雷开荣  陈 旭  蒋晓英  陶伟林
作者单位:1. 重庆市农业科学院生物技术研究中心,重庆,400055
2. 重庆市农业科学院蔬菜花卉所,重庆,400055
摘    要:本文以丝瓜(Luffa cylindrica (L.) M. Roem)基因组DNA为模板,采用正交试验设计,对SRAP (sequence related amplified polymorphism, 序列相关扩增多态性)反应体系中的4种关键因素(dNTPs、Taq酶、引物、模板)进行优化,建立了适合于丝瓜基因组SRAP分子标记的扩增体系:反应总体积10μl,其中含Taq酶1.0 U、模板DNA 50.00 ng、dNTPs 0.3mmol/L、引物0.30μmol/L。该体系能很好地满足丝瓜基因组SRAP标记的要求,可应用于丝瓜的分子生物学研究。

关 键 词:冬小麦  冬小麦  PEG-6000模拟干旱  水势  叶绿素  
收稿时间:2008-12-01
修稿时间:2009-01-07

Establishment and Optimization of SRAP-PCR Amplification System in loofah
Wu Hong,Lin Qing,Lei Kai-rong,Chen Xu,Jiang Xiao-ying,Tao Wei-ling. Establishment and Optimization of SRAP-PCR Amplification System in loofah[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2009, 25(4): 30-34
Authors:Wu Hong  Lin Qing  Lei Kai-rong  Chen Xu  Jiang Xiao-ying  Tao Wei-ling
Affiliation:Wu Hong ;Lin Qing ;Lei Kairong;Chen Xu ;Jiang Xiaoying ;Tao Weiling (1 Research Center of Biotechnology;Chongqing Academy of Agricultural Sciences;Chongqing 400055;2 Institute of Vegetables and Flowers;Chongqing Academy of Agricultural Sciences;Chongqing 400055)
Abstract:In this study, orthogonal experiments were designed to optimize the key parameters (dNTPs、Taq polymerase、primer、template DNA) of SRAP-PCR amplification system in loofah(Luffa cylindrica (L.) M. Roem). The results showed that the optimized reaction system included: DNA template 50ng, dNTPs 0.3mmol/L, primer 0.30μmol/L and Taq polymerase 1U in the 10ul total volume. This system is fit for the genome amplification of loofah and can be well used for the molecular biological research in loofah.
Keywords:SRAP-PCR
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