新疆多浪羊IL-1β基因地高辛探针的标记和敏感性检测 |
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引用本文: | 曾国航,徐宏伟,潘伊微,贾山岭,曹玉华,李莲瑞.新疆多浪羊IL-1β基因地高辛探针的标记和敏感性检测[J].新疆农业科学,2015,52(3):560-565. |
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作者姓名: | 曾国航 徐宏伟 潘伊微 贾山岭 曹玉华 李莲瑞 |
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作者单位: | 塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔,843300;新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔 843300;塔里木大学动物科学学院,新疆阿拉尔843300 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目“棉酚对新疆多浪羊白细胞介素表达影响研究”(30960277) |
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摘 要: | 目的]IL-1β是一种多效的促炎因子,在细胞因子炎性反应中为重要介质,处于介导炎性反应的重要因子,在造血和免疫活性中都发挥重要的作用.该实验结果为进一步研究绵羊分子免疫学,从多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的筛选基因,寻找与IL-1β相关的新基因奠定基础.方法]将构建好的多浪羊的pMD-18T-lL-1β质粒1]进行PCR扩增,经过切胶回收,目的基因的浓缩后,采用罗氏地高辛标记和检测试剂金标记IL-1β基因,获得IL-1β地高辛探针,进行敏感性检测,在Hybond N+膜上显影,计算探针浓度.结果]计算出标记后的探针浓度为17.1 g/mL.结论]通过southern杂交可以得知,Hybond N+膜上有IL-1β基因的双链DNA,标准杂交液中为DIG标记的IL-1β基因单链DNA,通过避光显色,在Hybond N+膜有深紫色的杂交条带,证明探针的浓度达到标准浓度.
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关 键 词: | 多浪羊IL-1β基因 地高辛 探针标记 检测 |
收稿时间: | 2015-03-25 |
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