| AtNPR1和Cecropin B基因共表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 孙立方,柯甫志,聂振朋,王平,孙建华,徐建国.AtNPR1和Cecropin B基因共表达载体的构建[J].浙江农业科学,2020,61(5):940-942. |
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| 作者姓名： | 孙立方 柯甫志 聂振朋 王平 孙建华 徐建国 |
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| 作者单位： | 浙江省柑橘研究所,国家柑橘品种改良中心浙江分中心,浙江 台州 318026 |
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| 基金项目： | 国家现代农业(柑桔)产业技术体系岗位科学家项目(CARS-26); 浙江省农业(果品)新品种选育重大科技专项(2016C2052-1); 浙江省农业科学院青年人才培养项目(10102000618AN0101F/005); 浙江省农业科学院扶持学科(柑橘育种)项目; 台州优势水果产业技术创新团队项目 |
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| 摘 要： | 柑橘病害严重影响其外观、品质和产量,给生产带来损失。本研究利用LP4/2A作为连接肽,构建AtNPR1和抗菌肽Cecropin B基因的共表达载体,为后期转化柑橘获得抗病材料做准备。以实验室前期构建的质粒为模板扩增AtNPR1基因,并人工合成连接肽LP4/2A和抗菌肽Cecropin B基因的编码序列。利用重叠PCR将AtNPR1和LP4/2A-Cecropin B重组,并连接至表达载体pBI121,获得以35S为启动子的35S:AtNPR1-LP4/2A-Cecropin B的共表达载体。同时,本研究还进一步将35S:AtNPR1-LP4/2A-Cecropin B的表达载体中35S启动子序列替换为韧皮部特异性启动子GRP1.8的序列,成功获得GRP1.8:AtNPR1-LP4/2A-Cecropin B的特异性共表达载体。目前,35S:AtNPR1-LP4/2A-Cecropin B和GRP1.8:AtNPR1-LP4/2A-Cecropin B共表达载体均构建完成并已成功转入农杆菌GV3101。抗病基因AtNPR1和Cecropin B共表达载体的构建将为以后转化和筛选转基因抗病柑橘准备材料。
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| 关 键 词： | AtNPR1 Cecropin B 共表达 载体构建 抗病 |
| 收稿时间： | 2020-03-19 |
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