家蚕微孢子虫Ubc9蛋白的基因克隆与功能研究

SUMO(small ubiquitin-like modifier)修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰，Ubc9(ubiquitin-conjugating enzyme)是SUMO修饰靶蛋白过程中唯一的E2结合酶，在SUMO修饰过程中发挥关键作用。本研究克隆了家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)NbUbc9基因的完整开放阅读框。序列分析表明，NbUbc9与所有来源于微孢子虫属(Nosema)的Ubc9聚类在同一大分支上，与同为Nosema属的西方蜜蜂微孢子虫(Nosema apis)和东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)Ubc9同源性最高，说明NbUbc9蛋白在进化上高度保守。qRT-PCR分析表明，家蚕内源性Ubc9的表达量在Nb感染后有所下降，而Nb自身NbUbc9的表达显著增加。对NbUbc9基因RNAi后，Nb基因组DNA的复制水平显著下降，说明NbUbc9在Nb的细胞增殖中起着关键作用。经Pull-down和质谱分析，初步鉴定出有46个家蚕蛋白和8个Nb蛋白可能与NbUbc9相互作用，涉及蛋白质折叠与转运、去泛素化、信号转导等。研究结果为进一步研...