| 禽传染性支气管炎病毒四川分离株M基因的克隆及真核表达载体构建 |
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| 引用本文： | 杨帆,王红宁,李春,吴琦,周生. 禽传染性支气管炎病毒四川分离株M基因的克隆及真核表达载体构建[J]. 四川畜牧兽医, 2003, 0(Z1) |
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| 作者姓名： | 杨帆 王红宁 李春 吴琦 周生 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物科技学院 四川雅安625014(杨帆，王红宁，李春，吴琦)，四川农业大学动物科技学院 四川雅安625014(周生) |
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| 摘 要： | 膜蛋白是禽传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白,可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇,能诱导细胞介导的免疫反应,但其免疫生物学功能尚不清楚。本研究选择禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBWJ,通过RT-PCR扩增获得其膜蛋白基因M基因并插入到PGEM-T载体中,获得重组质粒PGEM-M,将重组质粒中的克隆片段进行序列测定及分析。对PGEM-M进行双酶切获得M基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3.1+中,通过菌落PCR、双酶切证明获得了M基因的真核表达质粒。利用DNAstar软件将IBVSAIBwj株的膜蛋白基因的核苷酸序列与GenBank中的国内外参考毒株进行比较,其核苷酸序列的同源率为91.6%～98.8%,氨基酸序列的同源率为91.6%～99.6%。糖基化位点的增加和减少对M蛋白的抗原性产生很大的影响。在M蛋白近N端含有两个糖基化位点,第一个跨膜疏水区距离亲水区大约20个氨基酸。SAIBwjM基因核苷酸、氨基酸进化关系可以看出,SAIBwjM与国内外参考株的同源性均较高,因此可能具有交叉保护性抗原,可望用于制备诊断试剂及制备基因工程疫苗。由于IBV变异较大,常规疫苗不能产生完全保护力。在IBV的免疫保护机制中,细胞免疫起着关键的作用,近年来一些研究者已经进行了IBVDNA疫苗的研究,并取得了一定的进展。IBV的S1基因真核表达质粒可同时诱
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| 关 键 词： | 鸡传染性支气管炎病毒 M基因 真核表达质粒 |
Cloning,Sequencing and Constructiong Recombinant Eukaryatic Expression Vector of Membrane Gene of Infections Bronchitis Virus Isolated in Sichuan,China |
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| YANG Fan,WANG Hong-ning,LI Chun,WU Qi,ZHOU Sheng. Cloning,Sequencing and Constructiong Recombinant Eukaryatic Expression Vector of Membrane Gene of Infections Bronchitis Virus Isolated in Sichuan,China[J]. Sichuan Animal & Veterinary Sciences, 2003, 0(Z1) |
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| Authors: | YANG Fan WANG Hong-ning LI Chun WU Qi ZHOU Sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | avian infectious bronchitis virus M gene eukaryatic expression plasmid |
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