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猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP_1基因的克隆与序列分析
引用本文:娄高明,杜伟贤,魏平华,宋长绪,杨傲冰,周秀蓉,张春红,谢明权.猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP_1基因的克隆与序列分析[J].中国预防兽医学报,2001(5).
作者姓名:娄高明  杜伟贤  魏平华  宋长绪  杨傲冰  周秀蓉  张春红  谢明权
作者单位:广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室,广东省兽医生物技术重点实验室 广东广州510640,广东广
基金项目:广东省自然科学基金重大项目 (No96 30 0 7),广东省科技攻关项目 (No .99B0 5 6 0 1G),广东省农科院院长基金项目 (No96_基金_10 )
摘    要:本研究根据口蹄疫病毒 (FMDV)VP1基因的序列 ,设计并合成了 1对用于扩增整个VP1基因的引物 (5P、P6 )。从细胞培养液或组织中提取总RNA ,通过PT_PCR扩增 ,从F2 9株、O3I3株和T5 0 9株中均获得了 1条约 740bp的DNA电泳带。将PCR产物双酶切后电泳回收 ,插入到相应双酶切的pUC18质粒中 ,获得了重组质粒。通过PCR鉴定 ,证明重组质粒pUCVP1/F2 9、pUCVP1/O313、pUCVP1/T5 0 9均插入了VP1基因。对上述 3个重组质粒进行测序后分析 ,F2 9强毒株与O3I3、T5 0 9弱毒株相比 ,其核苷酸序列同源性分别为 98.75 %和 99.0 6 % ;因F2 9株核苷酸发生 3个碱基缺失与 1个碱基替换 ,故推导的氨基酸序列同源性分别仅为 44 .13%和 41.32 % ;而T5 0 9株与O3I3株相比 ,其核苷酸、氨基酸序列同源性分别为 99.37%和 95 .31%。通过序列分析发现 ,本研究的 3个毒株与国内大多数毒株 (包括 1997年台湾暴发FMDV所分离的毒株 ,除O/A/ 5 8株外 )均属于同一基因型 ,核苷酸序列同源性为 85 %~ 94% ;而与国外毒株相比 ,属不同的基因型 ,核苷酸序列同源性仅为 81%~ 82 %。其推导的氨基酸序列 ,除F2 9株与O/HK/ 93株及 1997年台湾暴发FMDV分离的少数毒株的氨基酸序列同源性仅为 45 %~ 6 3%外 ,本研究的 3个毒株与国内分离的大多数毒株的VP1

关 键 词:口蹄疫病毒  VP1基因  克隆  序列测定  

Cloning and Sequence Analysis of the VP_1 Gene of Virulence and Vaccine Strains of Foot-and-mouth Disease Virus Type O in Swine
LOU Gao_ming ,DU Wei_xian,WEI Ping_hua,SONG Chang_xu,YANG Ao_bing,ZHOU Xiu_rong,ZHANG Chun_hong,XIE Ming_quan.Cloning and Sequence Analysis of the VP_1 Gene of Virulence and Vaccine Strains of Foot-and-mouth Disease Virus Type O in Swine[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2001(5).
Authors:LOU Gao_ming  DU Wei_xian  WEI Ping_hua  SONG Chang_xu  YANG Ao_bing  ZHOU Xiu_rong  ZHANG Chun_hong  XIE Ming_quan
Institution:LOU Gao_ming *,DU Wei_xian,WEI Ping_hua,SONG Chang_xu,YANG Ao_bing,ZHOU Xiu_rong,ZHANG Chun_hong,XIE Ming_quan
Abstract:
Keywords:Foot_and_mouth disease virus  VP  1 gene  Cloning  Sequencing  Swine
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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