槟子脂氧合酶基因LOX2a的克隆与表达分析

【目的】脂氧合酶LOX是植物香气代谢脂氧合酶途径的起始酶，探究槟子（Malus pumila×M. asiatica）LOX2a基因在果实香气合成中的作用，为LOX2a基因在槟子果实中的功能研究奠定基础。【方法】以槟子转录组和挥发性物质检测数据为基础，筛选并克隆槟子LOX2a基因，利用生物信息学对其功能域、理化性质等进行预测，通过亚细胞定位分析LOX2a在细胞水平的表达位置，利用RT-qPCR检测LOX2a的时空表达水平，结合圆片温育和外源激素处理探究激素对LOX2a基因表达的调控作用。【结果】槟子LOX2a开放阅读框为2721 bp，编码906个氨基酸，含有一个保守的Lipoxygenase功能域，编码蛋白定位于细胞质；系统发育进化分析表明槟子LOX2a与苹果LOX2a同源性最高；槟子LOX2a在根部表达水平最高，种子中最低；在果实发育过程中花后30 d时表达水平最高，随后降低并维持在一定水平，到成熟（花后150 d）时表达水平上升；槟子LOX2a启动子上含有响应脱落酸、茉莉酸甲酯、赤霉素和水杨酸的顺式作用元件，且其表达受到这4种激素及乙烯的诱导。【结论】槟子LOX2a基因可能通过多...