共轭亚油酸对体外培养奶牛外周血单核细胞和脾细胞增殖和基因表达的影响

按照不同的饲喂方式(饲喂对照脂肪(CON)或添加共轭亚油酸(CLA))和屠宰时间,将25头初产荷斯坦奶牛分为5个处理组(每组5头).每日CLA的饲喂量为6.0g反10-顺12-CLA异构体和5.7g顺9-反11-CLA异构体.最初的1组(IG)在产后第1天屠宰,其余20头牛分别于产后42和105 d屠宰.分娩前7d和屠宰前采血分离外周血单核细胞(PBMC).屠宰解剖时采集脾脏分离脾细胞用于组织病理学检测.采用MTT法和Alamar Blue测定法检测细胞活力和刀豆蛋白A刺激的细胞增殖反应.利用实时定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)法测定未经刺激的外周血单核细胞及脾细胞中细胞因子(白细胞介素-4、白细胞介素-10、白细胞介素-12、肿瘤坏死因子-a和干扰素-7)的表达.结果表明,产后1～105 d PBMC刺激指数有所提高,但饲喂CLA组与对照组差异不显著.产后105 d,与对照组相比,饲喂CLA组奶牛脾细胞刺激指数有所下降.相同时间点饲喂CLA未影响细胞因子的基线表达.与IG组相比,PBMC中白细胞介素-4的表达无差异,而白细胞介素-10和肿瘤坏死因子-α表达量在PBMC和脾细胞这两种细胞中表达亦无差异.产后42 d,饲喂CLA组脾细胞中白细胞介素-4的表达量上升,产后105 d CLA组奶牛PBMC和脾细胞中干扰素-γ的表达量有所提高.与IG组相比,白细胞介素-12表达量在产后105 d的PBMC及产后42 d的脾细胞中均有提高.饲喂CLA和不同屠宰时间并未影响脾脏的组织病理情况.因此,本研究结果表明CLA对脾细胞的分裂素诱导活性具有抑制作用.